Esettanulmányok

  1. A tenyésztett PC12 phaeochromocytoma sejtek dopamin bioszintézisének stimulálása NADH-val
  2. A Prakinson betegség kezelésének új módszere: az endogén L-DOPA bioszintézis serkentése
  3. NADH, a Parkinson-betegség terápiájának új lehetősége
A tenyésztett PC12 phaeochromocytoma sejtek dopamin bioszintézisének stimulálása NADH-val

A tanulmány szerzői: K.Vrecko, J. G. D. Birkmayer, J. Krainz
Megjelent: Journal of Neural Transmission (1993) o: 147-156

A tirozin-hydroxiláz (TH) enzim - amelynek szintje Parkinson betegekben csökkent - aktivitását megmérték a tenyésztett PC12 patkány phaeochromocytoma sejtekben. Hasonlóképpen a médiumok DOPAMIN (DA) tartalmát is mérték a NADH-val, ill. NADH nélküli inkubáció után.
A kísérlet mutatja, hogy a NADH képes a TH enzim aktivitását növelni és a PC 12 sejtek dopamin termelését hatszorosáig fokozni. Az eredmények bizonyítják, hogy a NADH képes a DOPAMIN bioszintézisét serkenteni.
A Parkinson betegség biokémiai oka a substantia nigra dopaminerg idegsejtjeinek degenerációja.
A DA szintézis első lépcsője: a tirozin L-DOPA-vá alakulása.
Ezt a folyamatot a TH enzim katalizálja. Ezen enzim aktivitása jelentősen csökkent a Parkinson betegségben szenvedok agyában.
A TH egy vastartalmú enzim, amelynek kofaktora:
a TETRA-HYDRO-BIOPTERIN. (BH4) A BH4 mennyisége is csökkent a Parkinson betegek agyában. Ismert, hogy a BH4 DI-HYDRO-PTERIN-bol (BH 2) szintetizálódik a QUINONOID-DI-HYDRO-PTERIDINE-REDUKTáZ (DHPR) nevu enzim segítségével.
A DHPR koenzime az NADH.
Ha nincs elegendő aktív BH4, akkor NADH hozzáadásával a BH4 szintje emelhető, ami a TH aktiválásával DA szintéziséhez vezet.
A módszer részletezését lásd az eredeti cikkben.

Az eredméynekről:
(1) 250 mikrogram(mcg) NADH/ml-t a médiumhoz adva a kontrollmédiumhoz képest kb. 500% volt a DOPAMIN termelődés, azaz a DA bioszintézise NADH-val fokozható.
(2) 50, 100 ill. 200 mcg NADH/ml koncentrációban a médiumokhoz NADH-t adva az volt megfigyelhető, hogy a DA termelődés a koncentráció növelésével lineárisan nőtt. Médiumok sejtszáma azonos.
(3) M-HYDROXY-BENZYL-HYDRAZINE egy DOPA-dekarboxiláz inhibitor, amely csökkenti a DA bioszintézist.
(4) Tirozin koncentrációját kétszeresére növelve a DA termelodés nem változott.
(5) A médiumok sejtszámának növelésével no a DA mennyisége!
(6) NADH koncentráció növelésével 500mcg NADH/ml-ig lehetett a DA szintézisét lineárisan növelni.
(7) Az inkubációs idő növelésével nő a DA szintézis. A maximális DA szintézis 8 óránál hosszabb ideju inkubálással már nem fokozható.
(8) 40x106/15 ml sejttel a médiumban, 8 óra inkubációs idő alatt a legtöbb DA
400 mcg NADH/ml mellett szintetizálódott.
(9) TH aktivitása 150 mcg NADH/ml esetén 18%-kal, 400 mcg NADH/ml esetén pedig 75%-kal nott. Bizonyítottnak tekinthető, hogy a NADH direkt módon is képes a TH enzim aktivitását fokozni.

A Prakinson betegség kezelésének új módszere:
az endogén L-DOPA bioszintézis serkentése

A tanulmány szerzoi: G.J.D. Birkmayer, W. Birkmayer, Birkmayer Institute for Parkinson Therapy Vienna, Austria
Megjelent: Acta Neurol. Scand., 1989:126:183-187

A tanulmányban 161 beteg vett részt. Közülük 115-en nagyon jól, 28-an jól, 18-an nem reagáltak a kezelésre.
A legjobb eredéményeket másnaponta intravénásan adagolt 25-50mg NADH-val érték el.
Minden - a NADH-ra reagáló - beteg vizeletében a homovanillinsav (HVA) szint nott az emelkedett endogén L-DOPA szintézisnek megfelelően.

Az L-DOPA kezelést 1961-ben W. Birkmayer alkalmazta először.
Ismert, hogy az L-DOPA negatív feedback hatású a TIROZIN-HIDROXILáZ enzimre. Ez lehet a magyarázata annak, hogy az L-DOPA hatástalan számos Parkinson betegben, különösen hosszabb idejű kezelés esetén. Ezen tanulmány a NADH-nak a DA endogén bioszintézisére kifejtett hatását vizsgálja. A betegek 100 ml 0,9%-os steril NaCl (pH 7,4) oldatban oldott 25 mg NADH-t kaptak intravénásan naponta vagy másnaponta, állapotuktól függően.
A NADH oldatát mindig frissen beadás elott készítették el. A betegek állapotát a Birkmayer és Neumayer score alapján állapították meg és vizsgálták az infúzió beadása előtt és a beadást követő 4 órán belül. A kezelés 10-14 napig tartott.
Különösen a járás, a kezek használata, az állás, a beszéd és a mimika javult. A NADH elhagyása után a betegek állapota rosszabbodott. 15 esetben a hagyományos terápiát (Madopar) teljesen el lehetett hagyni a NADH használata mellett. A többi betegben az eredeti gyógyszerdózisokat az 1/3-ig lehetett csökkenteni. A napi „on-fázisok” hosszát 2-rol
9 órára lehetett növelni. A HVA vizeletben mért szintje emelkedett. A NADH az L-DOPA lehetséges helyettesíto szere. A NADH nem direkt prekurzora az L-DOPA-nak, hatását az L-DOPA természetes bioszintézisének fokozásával éri el.
Ezen tanulmányban 8 betegen a NADPH-t is vizsgálták. A NADPH-val kezelt betegek hasonlóan jó eredményeket mutattak.

NADH, a Parkinson-betegség terápiájának új lehetősége

A tanulmány szerzői: W. Birkmayer, M. D.,
G. J. D. Birkmayer, M. D., Ph. D.
Megjelent: Annals of Clinical and Laboratory Science, Vol. 19, No. 1.

A tanulmányban 34 beteg vett részt. Minden beteg állapotában javulást figyeltek meg.
A NADH effektivitása függött a dózistól és a betegség súlyosságától. A legjobb terápiás dózis: 25-50 mg/nap.
A homovanillinsav (HVA) mennyisége jelentősen nőtt a vizeletben. A napi "on-fázisok" hossza 2-rol 9 órára nőtt.
25 mg NADH-t adtak a betegeknek 100 ml intravénás infúzióban. Naponta ill. minden 2. nap, a betegség súlyosságától függoen. A kezelést 10-14 napig folytatták. A betegek életkora 40-85 év volt. A betegség időtartama 8-20 év.
A motoros funkciók közül legnagyobb mértékben a járás, a beszéd, a mimika, az állás és a "PUSHING" javult. A NADH infúzió hatása 1-4 napig tartott, a tünetek súlyosságától függoen. NADH megvonásával a betegek állapota rosszabbodott.
4 betegben a szokásos Madopar terápiát el lehetett hagyni, a többi betegnél az eredeti gyógyszerdózisokat egyre lehetett csökkenteni.

Kor (év) Betegség időtartama (év) NADH mg/nap mennyisége NADH előtti állapot B. és N. szerint NADH utáni állapot B. és N. szerint
1. 70 10 25 70 20
2. 63 10 25 60 20
3. 70 19 25 70 20
4. 66 16 25 60 20

A Parkinson betegségben szenvedok Birkmayer és Neumayer osztályozása szerint, ahol
1-100-ig terjedő skálán a betegség előrehaladottságát a magasabb osztályzatok jelentik.